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PCR實驗室空調(diào)通風系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制有哪些要求?
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
1試劑貯存和準備區(qū)
PCR實驗室
該領(lǐng)域的主要操作是儲存試劑的制備、試劑的分離和主反應(yīng)混合物的制備。試樣制備所用的試劑和材料應(yīng)直接運往該區(qū)域,不得通過其他區(qū)域。試劑的原材料必須儲存在區(qū)域內(nèi),所需的儲存試劑必須準備在區(qū)域內(nèi)。
這個區(qū)域?qū)鈮旱目刂茮]有嚴格的要求。
2標本制備區(qū)
該區(qū)域發(fā)展主要問題進行的操作為中國臨床研究標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存技術(shù)及其企業(yè)加入至擴增以及反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。
PCR實驗室設(shè)計
該區(qū)域的氣壓梯度是相對于鄰近區(qū)域的正壓力,以避免氣溶膠污染從鄰近區(qū)域進入該區(qū)域。此外,應(yīng)避免在該區(qū)域內(nèi)作不必要的移動,因為在采樣過程中可能會發(fā)生氣溶膠污染。
3.反應(yīng)混合物和擴增區(qū)的制備
該區(qū)域發(fā)展主要問題進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自不同樣本可以制備區(qū))的加入和主反應(yīng)體系混合液(來自其他試劑以及貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)形成混合液等也可在本區(qū)內(nèi)企業(yè)進行。在巢式PCR測定中,通常在我們第壹輪經(jīng)濟擴增后必須通過打開市場反應(yīng)管,因此巢式擴增有較高的污染具有危險性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)工作進行。
本區(qū)的壓力以及梯度發(fā)展要求為:相對于其他鄰近國家區(qū)域為負壓,以避免由于氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免產(chǎn)生氣溶膠影響所致的污染,應(yīng)盡量可以減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。
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